1主题内容与适用范围

本标准规定了用4-甲基伞形酮辛酯试剂快速检验出口食品中沙门氏菌的方法。

本标准适用于出口肉品、蛋品沙门氏菌的检验，其他食品可参照使用。

2引用标准

SN0170出口食品中沙门氏菌（包括亚利桑那菌）检验方法

3符号

MUCAP:4-methylumbelliferyl-caprylate（4-甲基伞形酮辛酯）的缩写。

MUCAP:试剂：用4-甲基伞形酮辛酯配成的试剂的缩写。

SS琼脂：沙门氏菌和志贺氏菌琼脂培养基。

HE琼脂：HektoenEnteric琼脂培养基。

4设备与材料

4.1紫外光灯：波长366nm，功率≥6W。

4.2放大镜：3～4X。

4.3毛细滴管。

5培养基与试剂

培养基与试剂按SN0170第5章，另补充以下部分：

5.1SS琼脂培养基（含1％蔗糖）：见附录A1。

5.2HE琼脂培养基：见附录A2。

5.3MUCAP试剂：见附录A3。

5.4氧化酶试纸：见附录A4。

6样品制备及增菌培养

参照SN0170进行。

7分离培养

7.1将增菌培养液摇匀,挑取一接种环，划线接种于SS和HE琼脂培养基各一个，于36

±1℃培养24±2h。

7.2观察各琼脂平板上有无可疑沙门氏菌菌落。如无可疑菌落，应再继续培养24±2h。

沙门氏菌的菌落特征见表1。

表1沙门氏菌属菌落特征

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菌落特征

──────────────────┬───────────────────

SS平板│HE平板

──────────────────┼───────────────────

圆形,边缘整齐；淡黄色,半透明，有或无│圆形，边缘整齐；蓝绿色至蓝色，有或无黑

黑色中心；周围培养基透明淡黄色│色中心；周围培养基透明墨绿色

──────────────────┴───────────────────

8测定

8.1从培养的分离培养基上选可疑沙门氏菌菌落（尽量选较大、分离较好的单个菌落），

用玻璃笔做好标记并编号。

8.2用毛细滴管吸取MUCAP试剂，加一滴于编号的菌落上。待一个平板的被检菌落全部

滴加试剂后，将平板拿至366nm紫外光灯下检视。发蓝色荧光的为MUCAP试验阳性，将阳

性菌落号记录下来。

8.3用接种环挑取荧光反应阳性菌落，涂于氧化酶试纸上，观察涂菌点是否变蓝色。于

10min内变蓝色为氧化酶试验阳性；不变色为阴性。

9结果的报告

9.1MUCAP试验阴性的样品，报告为“未检出沙门氏菌”

9.2MUCAP试验阳性氧化酶试验阴性的样品，按SN0170第四章继续进行生化和血清学试

验，并根据试验结果报告。

附录A

培养基和试剂

（补充件）

A1SS琼脂培养基（含1％蔗糖）

牛肉浸膏5.0g

蛋白胨5.0g

乳糖10.0g

蔗糖10.0g

胆盐No.38.5g

柠檬酸钠8.5g

硫代硫酸钠1.0g

柠檬酸亚铁1.0g

煌绿1.0g

中性红0.025g

琼脂13.5g

蒸馏水1000ml

将各成分溶于水，煮沸4～5min。最终pH7.0±0.2。冷至55～66°C，倾注平板。

A2HE琼脂培养基

(月示)蛋白胨12.0g

酵母浸出物3.0g

乳糖12.0g

蔗糖12.0g

水杨素2.0g

混合胆盐9.0g

氯化钠5.0g

硫代硫酸钠5.0g

柠檬酸铁铵1.5g

溴麝香草酚蓝0.065g

酸性复红0.1g

琼脂14.0g

蒸馏水1000mL

将各成分溶于水，煮沸4～5min。最终pH7.5±0.2。冷至55～60°C，倾注平板。

A3MUCAP试剂

按生产者提供的使用说明制备工作稀释液，贮于4°C冰箱备用。

A4氧化酶试纸

氧化酶试液：

甲液：

1％α-萘酚乙醇液；

乙液：

1％二甲基对苯二胺草酸盐水溶液。

氧化酶试纸：

将甲液与乙液等量混合。取定性滤纸，浸透混合液后，于70～80°C烘箱烘干。剪成

适当大小的纸条，密封于塑料袋或瓶中，贮于4°C冰箱备用。

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附加说明：

本标准由中华人民共和国国家进出口商品检验局提出。

本标准由中华人民共和国内蒙古进出口商品检验局起草。

本标准主要起草人甄宏太、杨素贤、刘中学、苏庆、周云霞。

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中华人民共和国国家进出口商品检验局1994-12-26批准1995-05-01实施��